產(chǎn)品概述：

Thermo Scientific 金黃色葡萄球菌 V-8 蛋白酶，也稱為胞內(nèi)蛋白酶 Glu-C，擁有兩種最佳 pH 值，一種 pH 值為 4.0，另一種 pH 值為 7.8，專門針對(duì)在谷氨酸和天冬氨酸殘基的羧基端裂解。蛋白酶專門僅針對(duì)在任一最佳 pH 值處均不含磷酸鹽的緩沖液中的谷氨酸酶切。pH 值 7.8 的磷酸鹽緩沖液將促進(jìn)在谷氨酸和天冬氨酸殘基處的酶切。

金黃色葡萄球菌 V-8 蛋白酶的特點(diǎn)：

?特異性—谷氨酸特異性在碳酸氫銨（pH 值 7.8）或醋酸銨（pH 值 4）中實(shí)現(xiàn)
?活性—在存在多種變性劑（如 SDS、尿素和鹽酸胍）的情況下存在酶活性

金黃色葡萄球菌 V-8 蛋白酶非常穩(wěn)定，即使在 6 M 尿素、5.5 M 鹽酸胍、0.5% SDS 或 0.5% SDS + 6 M 尿素（0°C，pH 值 7.6）中仍能夠保留其活性。這與蛋白酶的天然結(jié)構(gòu)主要通過(guò)靜電相互作用而不是通過(guò)氫鍵合和 β 結(jié)構(gòu)穩(wěn)定這一事實(shí)有關(guān)。

在任何蛋白水解酶切過(guò)程中都存在兩個(gè)重要問(wèn)題。第一個(gè)問(wèn)題是必須對(duì)反應(yīng)進(jìn)行猝滅以停止酶切，從而稀釋樣品。第二個(gè)問(wèn)題是樣品被蛋白酶污染，可能是自動(dòng)酶切的蛋白酶片段。這些問(wèn)題可通過(guò)固定化 V-8 蛋白酶克服。使用固定化蛋白酶時(shí)，無(wú)需淬滅，樣品中的蛋白酶污染或蛋白酶自身消化不會(huì)有問(wèn)題。只需從瓊脂糖基質(zhì)中分離樣品溶液即可消除這些問(wèn)題。